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冰凍切片包埋劑及使用方法

發(fā)布時間:2012/8/4點擊次數(shù):451

上海寶葉生物科技有限公司

冰凍切片包埋劑及使用方法

OCT 冰凍切片包埋劑是一種聚乙二醇和聚乙烯醇的水溶性混合物,目前已廣泛用于免疫組化實驗室中,

其用途是在冰凍切片時支撐組織,以增加組織的連續(xù)性,減少皺折及碎裂。又因OCT 混合物為水溶性,故

在漂片時可溶于水,所以在以后的染色中不會增加背景染色。

利用OCT 混合物(opti-mum cutting temperature compound)預(yù)先浸潤組織,然后再進行恒冷箱切片,

使切片質(zhì)量得到改善。

目前實驗室使用的冰凍切片包埋劑主流產(chǎn)品是日本櫻花公司的O.C.T. Compound ,貨號:4583,118ml/

瓶,質(zhì)量穩(wěn)定,研究者比較熟習(xí)。

在使用OCT 進行包埋時,對于包埋模具而言,您可以選擇廠家已有的產(chǎn)品,也可以根據(jù)實際條件利用手

邊已有的包埋管、包埋板等;也有心靈手巧的研究者自己利用銅版紙折疊出很漂亮實用的OCT 包埋模具(當(dāng)

然前提是您的用量要少)。

OCT 包埋劑(SAKURA 產(chǎn)品)包埋流程:

1. 將放在蔗糖溶液中的組織塊取出,放入20g L-1 蔗糖與OCT 包埋劑1體積比例混合液中,室溫浸

2h

2. 移入OCT 包埋劑中室溫浸泡4h,更換新的OCT 包埋劑,室溫浸泡6h.

3. 將標(biāo)本置于托物臺,用恒冷箱切片機切片(一般-22℃),片厚10μm,貼于預(yù)處理的載玻片上,-20

冰箱保存。

在實際工作中,有研究者發(fā)現(xiàn)當(dāng)包埋的樣本體積較大或者冰凍溫度要求更低一點時,使用櫻花的Oct(貨

號:4583)進行包埋往往很難取得理想的包埋結(jié)果。當(dāng)您遇到這樣的麻煩時,我們建議您采用另外一種Oc

包埋劑Tissue Freezing Medium,美國TBS 公司生產(chǎn)(貨號:72592)。

如果該文對您的學(xué)習(xí)和研究能有絲毫幫助,我們都會備感欣慰

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